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細(xì)胞周期

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生命是從一代向下一代傳遞的連續(xù)過程,因此是一個(gè)不斷更新、不斷從頭開始的過程。細(xì)胞的生命開始于產(chǎn)生它的母細(xì)胞的分裂, 結(jié)束于它的子細(xì)胞的形成,或是細(xì)胞的自身死亡。通常將通過細(xì)胞分裂產(chǎn)生的新細(xì)胞的生長(zhǎng)開始到下一次細(xì)胞分裂形成子細(xì)胞結(jié)束為止所經(jīng)歷的過程稱為細(xì)胞周期。在這一過程中,細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個(gè)子細(xì)胞?! ?/p>

目錄

細(xì)胞周期兩階段

細(xì)胞周期(cell cycle)是指細(xì)胞從第一次分裂結(jié)束產(chǎn)生新細(xì)胞到第二次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程,分為間期與分裂期兩個(gè)階段。

(一) 間期

間期又分為三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。

1. G1期 此期長(zhǎng)短因細(xì)胞而異。體內(nèi)大部分細(xì)胞在完成上一次分裂后,分化并執(zhí)行各自功能,此G1期的早期階段特稱G0期。在G1期的晚期階段,細(xì)胞開始為下一次分裂合成DNA所需的前體物質(zhì)、能量和酶類等做準(zhǔn)備。

2. S 期 是細(xì)胞周期的關(guān)鍵時(shí)刻,DNA經(jīng)過復(fù)制而含量增加一倍,使體細(xì)胞成為4倍體,每條染色質(zhì)絲都轉(zhuǎn)變?yōu)橛?a href="/w/%E7%9D%80%E4%B8%9D%E7%82%B9" title="著絲點(diǎn)">著絲點(diǎn)相連接的兩條染色質(zhì)絲。與此同時(shí),還合成組蛋白,進(jìn)行中心粒復(fù)制。S期一般需幾個(gè)小時(shí)。

3. G2期 為分裂期做最后準(zhǔn)備。中心粒已復(fù)制完畢,形成兩個(gè)中心體,還合成RNA和微管蛋白等。G2期比較恒定,需用1~1.5小時(shí)。

(二)分裂期

M 期:細(xì)胞分裂期。

細(xì)胞分裂期:前期,中期,后期,末期。

細(xì)胞的有絲分裂(mitosis)需經(jīng)前、中、后,末期,是一個(gè)連續(xù)變化過程,由一個(gè)母細(xì)胞分裂成為兩個(gè)子細(xì)胞。一般需1~2小時(shí)。

1. 前期(prophase)染色質(zhì)絲高度螺旋化,逐漸形成染色體(chromosome)。染色體短而粗,強(qiáng)嗜堿性。兩個(gè)中心體向相反方向移動(dòng),在細(xì)胞中形成兩極;而后以中心粒隨體為起始點(diǎn)開始合成微管,形成紡錘體。隨著核仁相隨染色質(zhì)的螺旋化,核仁逐漸消失。核被膜開始瓦解為離散的囊泡內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。

2. 中期(metaphase)細(xì)胞變?yōu)榍蛐?,核仁與核被膜已完全消失。染色體均移到細(xì)胞的赤道平面,從紡錘體兩極發(fā)出的微管附著于每一個(gè)染色體的著絲點(diǎn)上。從中期細(xì)胞可分離得到完整的染色體群,共46個(gè),其中44個(gè)為常染色體,2個(gè)為性染色體。男性的染色體組型為44+XY,女性為44+XX。分離的染色體呈短粗棒狀或發(fā)夾狀,均由兩個(gè)染色單體借狹窄的著絲點(diǎn)連接構(gòu)成。

3.后期(anaphase)由于紡錘體微管的活動(dòng),著絲點(diǎn)縱裂,每一染色體的兩個(gè)染色單體分開,并向相反方向移動(dòng),接近各自的中心體,染色單體遂分為兩組。與此同時(shí),細(xì)胞波拉長(zhǎng),并由于赤道部細(xì)胞膜下方環(huán)行微絲束的活動(dòng),該部縮窄,細(xì)胞遂呈啞 鈴形。

4.末期(telophase)染色單體逐漸解螺旋,重新出現(xiàn)染色質(zhì)絲與核仁;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊泡組合為核被膜;組胞赤道部縮窄加深,最后完全分裂為兩個(gè)2倍體的子細(xì)胞。

G0期:暫時(shí)離開細(xì)胞周期,停止細(xì)胞分裂,去執(zhí)行一定生物學(xué)功能的細(xì)胞所處的時(shí)期。

在體內(nèi)根據(jù)細(xì)胞的分裂能力可把它們分為三類:①增殖細(xì)胞群,如造血干細(xì)胞,表皮與胃腸粘膜上皮干細(xì)胞。這類細(xì)胞始終保持活躍的分裂能力,連續(xù)進(jìn)入細(xì)胞周期循環(huán);②不再增殖細(xì)胞群,如成熟的紅細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、心肌細(xì)胞等高度分化的細(xì)胞,它們喪失了分裂能力,又稱終末細(xì)胞(end cell);③暫不增殖細(xì)胞群,如肝細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞、甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞。它們是分化的,并執(zhí)行特定功能的細(xì)胞,在通常情況下處于G0期,故又稱G0期細(xì)胞。在某種刺激下,這些細(xì)胞重新進(jìn)入細(xì)胞周期。如肝部分切除術(shù)后,剩余的肝細(xì)胞迅速分裂?! ?/p>

細(xì)胞周期的DNA檢測(cè)

Ⅰ、樣品準(zhǔn)備 準(zhǔn)備以下一種或幾種樣品

A、組織單細(xì)胞懸浮液(如淋巴腺、脾、骨髓胎盤細(xì)胞)

細(xì)胞dna

B、組織培養(yǎng)細(xì)胞

C、Ficoll-hypaque分離的單核細(xì)胞

Ⅱ、反應(yīng)體系-DNA低滲緩沖液

檸檬酸三鈉 0.25g

Triton-X 100 0.75ml

Propidium iodide 0.025g

核糖核酸酶 0.005g

蒸餾水 250ml

我們將該DNA低滲溶液于密閉瓶子中存放數(shù)月后并無(wú)發(fā)現(xiàn)有任何染色活性的丟失

Ⅲ、染色

1、 每一個(gè)管子中放入1×106個(gè)細(xì)胞;

2、 樣品離心后盡可能完全地移去上清液,并且不要打碎沉淀塊;

3、 入1ml的DNA低滲染色緩沖液至沉淀中,并混勻;

4、 樣品于4℃下避光30分鐘或最長(zhǎng)不超過1個(gè)小時(shí)以備流式細(xì)胞儀分析。

注意:延長(zhǎng)在低滲緩沖液的曝光時(shí)間會(huì)引起樣品碎片的增加。  

細(xì)胞周期檢測(cè)作為生物相容性評(píng)價(jià)指標(biāo)

應(yīng)用體外細(xì)胞培養(yǎng)法,觀察不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)羥基磷灰石浸提液對(duì)L-929細(xì)胞的細(xì)胞學(xué)形態(tài)的影響,同時(shí)采用MTT比色法評(píng)價(jià)羥基磷灰石對(duì)L-929生長(zhǎng)和增殖的影響,流式細(xì)胞儀檢測(cè)羥基磷灰石浸提液對(duì)L-929細(xì)胞生長(zhǎng)周期及凋亡的影響。結(jié)果表明,羥基磷灰石浸提液對(duì)體外培養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)無(wú)明顯影響,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖無(wú)明顯抑制作用;不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)材料浸提液的細(xì)胞毒性為 0~1級(jí),隨羥基磷灰石浸提液質(zhì)量分?jǐn)?shù)的升高,細(xì)胞凋亡率逐漸上升;50%、75%、100%羥基磷灰石浸提液組能明顯降低G0 /G1 期細(xì)胞比例,增加S,G2 /M期細(xì)胞比例,能增加L-929細(xì)胞DNA的合成,促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和組織修復(fù)。細(xì)胞周期檢測(cè)是生物材料生物相容性評(píng)價(jià)的一種可靠方法和指標(biāo)?! ?/p>

細(xì)胞周期(細(xì)胞有絲分裂)口訣

有絲分裂并不難

間前中后末相連

間期DNA復(fù)制,蛋白質(zhì)合成在其間

前期兩消和兩現(xiàn)

中期著絲點(diǎn)排列在中央赤道板

后期絲牽染體分兩組

末期兩消兩現(xiàn)壁重建  

歷史上不同版本的定義

1、細(xì)胞周期是第一次分裂開始到第二次分裂開始所經(jīng)歷的全過程。《普通生物學(xué)》陳閱增

2、細(xì)胞周期是第一次分裂結(jié)束到第二次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程?!?a href="/w/%E7%BB%86%E8%83%9E%E7%94%9F%E7%89%A9%E5%AD%A6" title="細(xì)胞生物學(xué)">細(xì)胞生物學(xué)》

兩者區(qū)別是細(xì)胞分裂起點(diǎn)的不同。現(xiàn)在普遍接受的是第二種說法。

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