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醫(yī)用化學/比色測量儀器

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醫(yī)用化學

醫(yī)用化學目錄

(一)比色測量儀器的基本部件

比色測量儀器一般包括以下五大部件(圖8-4)。

比色測量儀器部件示意圖


圖8-4 比色測量儀器部件示意圖

1.光源

在光電比色計和可見光分光亮度計中,采用6~12V的鎢燈,其最適宜的波長范圍是360~1000nm,為使光的強度穩(wěn)定,須用穩(wěn)壓裝置來穩(wěn)定電壓。

2.波長控制器

在光電比色計中采用濾光片作為波長控制器。濾光片是有色玻璃片,其作用是從光源發(fā)出的連續(xù)光譜中分出實驗所需的某一特定波長范圍的光,即獲得適當波長的近似單色光。

選擇濾光片的原則是濾光片最易透過的光,也就是溶液最易吸收的光。即濾光片的顏色與溶液的顏色應互為補色,這是因為有色溶液對它的互補色光有最大的吸收。581-G型光電比色計通常只有紅、綠和藍三塊濾光片。例如,要測定KMnO4溶液,就應選用綠色濾光片。

分光光度計采用單色器來控制波長。它可以把連續(xù)波長的光分解,從中得出任一所需波長的更純的單色光。單色器包含有狹縫調節(jié)、透鏡系統(tǒng)以及色散元件。

圖8-5為自準式單色光器。光源發(fā)出的光經入射狹縫由凹面準直鏡反射后的平行光投在棱鏡上,經棱鏡色散后的光又經準直鏡反射到出射狹縫,轉動棱鏡便可在出射狹縫得到所需波長的單色光。

自準式單色光器示意圖


圖8-5 自準式單色光器示意圖

硒光電效應示意圖


圖8-6 硒光電效應示意圖

3.吸收池

吸收池供比色時盛溶液用,它是用無色透明、厚度均勻的玻璃制成的。其透光的兩面嚴格平行。同一系列的測定中,所用的比色皿必須配套,即同一配套比色皿盛有同一溶液在同一波長時測得的透光率誤差不得越過0.5%。實驗時可根據溶液的濃度不同選擇。0.5,1.0,2.0,3.0cm不同規(guī)格的比色皿。比色皿要保持清潔,透光面要注意保護,不得用手直接接觸或用粗糙的濾紙擦拭,以免劃傷表面,影響吸收程度。若外壁有液珠,應用濾紙吸干后再用擦鏡紙擦凈。

4.光電轉換器

它是將光能轉換成電信號的器件,常用的有光電池和光電管。

光電池常用的硒光電池如圖8-6,適用 于380~750nm波長范圍。當光線照射到光電池時,電子從半導體表面逸出。由于硒的半導體特性而在電路中產生光電流。將光電池與一個靈敏檢流計相聯,在照射光強度不太大且外電路電陰很小時,光電流大小與照射光的強度成正比。因此可根據光電流的大小測量透過溶液的光強度。

硒光電池的優(yōu)點是光電流較大,可不必經過放大而直接用靈敏檢流計測量。有時當光電池受強光照射或連續(xù)使用時間太長時,容易產生“疲勞”,這時需使其在暗的狀態(tài)下暫作恢復,方可繼續(xù)使用。

光電管由封裝在真空透明管中的一個半圓柱型陰極和一個絲狀陽極組成(圖8-7)。陰極凹面有光電發(fā)射材料層,被光照射可發(fā)電子。當兩極間加有電壓時,發(fā)射出來的電子就流向陽極產生光電流。發(fā)射出的電子數目與射在該表面上光束的強度成正比。光電管產生的電流啼弱,經放大器放大后可由微安電表直接指示出吸光度或透光率。

光電管線路示意圖


圖8-7 光電管線路示意圖

吸光度和透光率標尺


圖8-8 吸光度和透光率標尺

5.檢流計

用光電池作光電轉換器的比色測量儀器中,檢流計一般采用懸鏡式光電反射檢流計,其靈敏度較高,能測量10-9A(安培)的電流。檢流計有吸光度A和百分透光率T(%)兩種刻度標尺,可直接讀數(圖8-8)。

標尺上透光率T是等分的而吸光度A的刻度是不均勻的。透光率T可用小數或百分率表示。A與T的關系可推導為:

Gmogv5wu.jpg


例如,已知某溶液對某一波長的光吸光度為0.04,其透光率可由下面方法求得。

0.04=-lgT

lgT=-0.40

T=0.398=39.8%

又如,已知某溶液對某一波長光的透光率為65%,吸光度為:

581-G型光電比色計光學線路示意圖


對于用光電管作光電轉換器的儀器,由于加了放大器,可方便地連接微安電表、記錄儀,數字顯示器等指示器,也可以調節(jié)電橋平衡的方式讀數取數據。

(二)比色測量儀器

1.光電比色計

光電比色計用光電池和檢流計測量透射光的強度并直接可讀出百分透光率T(%)或吸光度A。圖8-9是581-G型光電比色計的示意圖。它是利用濾光片把鎢燈產生的白光中與測定無關的光除去,使入射光盡可能是接近溶液補色的單色光,從而提高了比色分析的準確度。

721型分光光度計光學系統(tǒng)示意圖


圖8-9 581-G型光電比色計光學線路示意圖

圖8-10 721型分光光度計光學系統(tǒng)示意圖1.光源 2.,8.聚

光透鏡 3.棱鏡 4.準直鏡5.,11.保護玻璃 6.入射狹縫 7.

平面鏡 9.吸收池10.光門 12.光電管 13.光柵

2.721型分光光度計

721型分光光度計的工作波長范圍為360-800nm。采用真空光電管作為光電能量轉換元件,在整個可見光區(qū)都比較靈敏。同時采用晶體管放大電路和電表直讀結構,儀器的靈敏度和穩(wěn)定性都比較好。

圖8-10為721型分光光度計的光學系統(tǒng)示意圖。由光源發(fā)出的連續(xù)輻射于聚光鏡上,經平面鏡轉角90度反射到入射狹縫,射入單色器。入射光經過準直鏡反身射在出射狹縫上,再經過聚光透鏡后進入比色皿。經溶液吸收后的透射光通過光門照射在光電管上轉換為光電流信號,經過入大后輸入檢流計,由電表直接顯示吸光度。

32 比色分析測量儀器和測量方法 | 比色分析的測量方法 32
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